Estudio de la Caspasa-3 en un modelo experimental de precondicionamiento isquémico neuronal en cultivo

  • Victoria López Tejero
    Instituto de Investigación Biomédica de Salamanca
  • María Delgado-Esteban
    Instituto de Investigación Biomédica de Salamanca mdesteban[at]usal.es
  • Juan Pedro Bolaños
    Instituto de Investigación Biomédica de Salamanca

Resumen

En los seres humanos, los ataques isquémicos trainsitorios (AIT) son el correlato clínico de precondicionamiento isquémico cerebral (IPC) que conduce a la resistencia transitoria llamada tolerancia isquémica (TI). Los mecanismos moleculares subyacentes todavía no se entienden completamente. Recientemente, se ha demostrado que la activación de las proteasas llamadas caspasas desempeñan un papel importante en la muerte apoptótica asociada a la isquemia.En el presente trabajo estudiamos la caspasa-3 en la neuroprotección inducida por el IPC. Para ello, las neuronas corticales en cultivo primario se expusieron a una concentración subtóxica moderada de N-metil-Daspartato (NMDA; 20?M NMDA; condición IPC) durante 2 horas, seguido de incubación durante otros 90 min en normoxia (presencia de oxígeno y glucosa) o isquémica (oxígeno y privación de glucosa; OGD). En paralelo, las neuronas control no fueron estimuladas con NMDA. Después de 4 horas de incubación en medio de cultivo, se analizó la apoptosis neuronal (Anexina-V-tinción) por citometría de flujo. Además, se determinó la actividad de la caspasa-3 y la expresión de la caspasa-3 activa usando el ensayo de fluorimetría e Inmunofluorescencia, respectivamente.Previamente, los resultados obtenidos en el grupo demostraron que el IPC previno la apoptosis inducida por la OGD en las neuronas. En este trabajo mostramos que el IPC impidió la activación de la caspasa-3 inducida por la OGD. Estos hallazgos demuestran el papel clave de la vía de señalización de la apoptosis en la neuroprotección inducida por IPC contra un daño isquémico posterior y señala a la caspasa-3 como diana esencial asociada a la tolerancia isquémica.
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Almeida A, Delgado-Esteban M, Bolaños JP, Medina J. Oxygen and glucose deprivation induces mitochondrial dysfunction and oxidative stress in neurones but not in astrocytes in primary culture. J Neurochem. 2002; 81(2):207-217.

Fernández-Gómez F, Hernández F, Argandoña L, Galindo M, Segura T, Jordán J. Farmacología de la neuroprotección en el ictus isquémico agudo. Rev Neurol. 2008; 47(5):253-260.

Gomez-Sanchez J, Delgado-Esteban M, Rodriguez-Hernandez I, Sobrino T, Perez de la Ossa N, Reverte S et al. The human Tp53 Arg72Pro polymorphism explains different functional prognosis in stroke. JEM. 2011; 208(3):429-437.

Kirino T. Ischemic Tolerance. J Cereb Blood Flow Metab. 2002; 22(11):1283-1296.

Sánchez-Pérez M, Álvarez Barrientos A. Inmunología aplicada y técnicas inmunológicas. 1ª ed. Madrid: Síntesis; 1998.

Soriano F. Preconditioning Doses of NMDA Promote Neuroprotection by Enhancing Neuronal Excitability. J. Neurosci. 2006; 26(17):4509-4518.

Técnicas Histológicas. 5-Tinción: inmunocitoquímicas. Atlas de Histología Vegetal y Animal [Internet]. Vigo: departamento de Biología Funcional y Ciencias de la Salud, Universidad de Vigo; 2003 [actualizo 03 mar 2015; citado 03 may 2016]. Disponible en: http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/5-inmuno.php

Vasdekis S, Athanasiadis D, Lazaris A, Martikos G, Katsanos A, Tsivgoulis G et al. The role of remote ischemic preconditioning in the treatment of atherosclerotic diseases. Brain Behav. 2013; 3(6):606-616.

Vijayakumar T, Sangwan A, Sharma B, Majid A, GK R. Cerebral Ischemic Preconditioning:

the Road So Far… Mol Neurobiol. 2015; 53(4):2579-2593
López Tejero, V., Delgado-Esteban, M., & Bolaños, J. P. (2017). Estudio de la Caspasa-3 en un modelo experimental de precondicionamiento isquémico neuronal en cultivo. FarmaJournal, 2(1), 121–131. Recuperado a partir de https://revistas.usal.es/cinco/index.php/2445-1355/article/view/15248

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Biografía del autor/a

María Delgado-Esteban

,
Instituto de Investigación Biomédica de Salamanca
Instituto de Investigación Biomédica de Salamanca (IBSAL)/Instituto de Biología Funcional y Genómica (IBFG/CSIC-USAL)  C/ Zacarías González 2.

Juan Pedro Bolaños

,
Instituto de Investigación Biomédica de Salamanca
Instituto de Investigación Biomédica de Salamanca (IBSAL)/Instituto de Biología Funcional y Genómica (IBFG/CSIC-USAL)  C/ Zacarías González 2.
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