Silenciamiento de la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH) en células de carcinoma de riñón humano HEK-293T, mediante la técnica del ARN de interferencia
Resumen El papel de la ruta de las pentosas fosfato, así como su contribución total en la glucólisis son a día de hoy todavía una incógnita. Tras haberse descubierto recientemente una relación directa entre una sobreexpresión de dicha ruta y la proliferación de diversos tumores malignos, clarificar ambas cuestiones ha cobrado especial importancia en la lucha contra el cáncer. En este estudio se ha realizado el silenciamiento de la enzima que cataliza la primera reacción de dicha ruta, la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, por medio del ARN de interferencia y utilizando como línea celular células de carcinoma de riñón humano HEK-293T. La medición de la repercusión del silenciamiento se ha realizado mediante la medida de lactato (?mol/mg de proteína)/24h, utilizándose células con el gen de la luciferasa silenciado como grupo control. Los resultados obtenidos han puesto de manifiesto una notoria disminución de la producción de lactato en las células con la enzima silenciada: 2.73 ?mol/mg de proteína/24h en comparación con 7.81 ?mol/mg de proteína/24h en el grupo control; lo que nos lleva a la conclusión de que la ruta de las pentosas fosfato contribuye de manera muy significativa en la producción de piruvato por medio de la glucólisis.
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Akinc, A, Thomas M, Klibanov AM, Langer R. Exploring polyethylenimine-mediated DNA transfection and the proton sponge hypothesis. J Gene Med. 2004; 7(5): 657–663.
Bouzier-Sore AK, Bolaños JP. Uncertainties in pentose-phosphate pathway flux assessment underestimate its contribution to neuronal glucose consumption: relevance for neurodegeneration and aging. Front in Aging Neurosci. 2015; 19(7):89.
Dallas A, Vlassov AV. RNAi: a novel antisense technology and its therapeutic potential. Med Sci Monit. 2006; 12(4): RA67-74.
Jiang P, Du W, Wu M. Regulation of the pentose phosphate pathway in cancer. Protein Cell. 2014; 5(8):592-602.
Kletzien RF, Harris PK, Foellmi LA. Glucose-6-phosphate dehydrogenase: a “housekeeping” enzyme subject to tissue-specific regulation by hormones, nutrients, and oxidant stress. FASEB J. 1994; 8(2):174-81.
Nelson D, Cox M. Principios de bioquímica Lehninger. 4ª ed. Barcelona: Omega; 1995.
Rodriguez-Rodriguez P, Fernandez E, Bolaños JP. Underestimation of the pentose-phosphate pathway in intact primary neurons as revealed by metabolic flux analysis. J Cereb Blood Flow Metab. 2013; 33(12):1843-5.
Rudolph C, Lausier J, Naundorf S, Müller RH, Rosenecker J. In vivo gene delivery to the lung using polyethylenimine and fractured polyamidoamine dendrimers. J Gene Med. 2000; 2(4): 269–78.
Sen GL, Blau HM. A brief history of RNAi: the silence of the genes. FASEB J. 2006; 20(9):1293-9.
Stincone A, Prigione A, Cramer T, Wamelink MM, Campbell K, Cheung E et al. The return of metabolism: biochemistry and physiology of the pentose phosphate pathway. Biol Rev Camb Philos Soc. 2014; 90(3):927-963.
Thomas P, Smart TG. HEK293 cell line: a vehicle for the expression of recombinant proteins. J Pharmacol Toxicol Methods. 2005; 51(3):187-200.
Bouzier-Sore AK, Bolaños JP. Uncertainties in pentose-phosphate pathway flux assessment underestimate its contribution to neuronal glucose consumption: relevance for neurodegeneration and aging. Front in Aging Neurosci. 2015; 19(7):89.
Dallas A, Vlassov AV. RNAi: a novel antisense technology and its therapeutic potential. Med Sci Monit. 2006; 12(4): RA67-74.
Jiang P, Du W, Wu M. Regulation of the pentose phosphate pathway in cancer. Protein Cell. 2014; 5(8):592-602.
Kletzien RF, Harris PK, Foellmi LA. Glucose-6-phosphate dehydrogenase: a “housekeeping” enzyme subject to tissue-specific regulation by hormones, nutrients, and oxidant stress. FASEB J. 1994; 8(2):174-81.
Nelson D, Cox M. Principios de bioquímica Lehninger. 4ª ed. Barcelona: Omega; 1995.
Rodriguez-Rodriguez P, Fernandez E, Bolaños JP. Underestimation of the pentose-phosphate pathway in intact primary neurons as revealed by metabolic flux analysis. J Cereb Blood Flow Metab. 2013; 33(12):1843-5.
Rudolph C, Lausier J, Naundorf S, Müller RH, Rosenecker J. In vivo gene delivery to the lung using polyethylenimine and fractured polyamidoamine dendrimers. J Gene Med. 2000; 2(4): 269–78.
Sen GL, Blau HM. A brief history of RNAi: the silence of the genes. FASEB J. 2006; 20(9):1293-9.
Stincone A, Prigione A, Cramer T, Wamelink MM, Campbell K, Cheung E et al. The return of metabolism: biochemistry and physiology of the pentose phosphate pathway. Biol Rev Camb Philos Soc. 2014; 90(3):927-963.
Thomas P, Smart TG. HEK293 cell line: a vehicle for the expression of recombinant proteins. J Pharmacol Toxicol Methods. 2005; 51(3):187-200.
Gutierrez, B., & Bolaños, J. P. (2016). Silenciamiento de la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH) en células de carcinoma de riñón humano HEK-293T, mediante la técnica del ARN de interferencia. FarmaJournal, 1(1), 73–83. Recuperado a partir de https://revistas.usal.es/cinco/index.php/2445-1355/article/view/13230
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